密度梯度分離方法是分離生物大分子常用的方法,,其顯著特點是獲得的樣品純度高,。但是實驗步驟復(fù)雜,尤其是密度梯度制備過程,,人工操作重復(fù)性差,。因此,,急需全自動程序化設(shè)備來提高實驗重復(fù)性、準(zhǔn)確性及工作效率,。
加拿大BioComp公司生產(chǎn)的密度梯度制備儀和分離儀成為密度梯度制備的金標(biāo)準(zhǔn),,為廣大科研工作者提供了巨大的幫助。如下是近期使用Biocomp儀器在國際期刊上發(fā)表相關(guān)文獻(xiàn),。
1,、2019年2月《NATURE COMMUNICATIONS》雜志上發(fā)表《同源六聚體T3SS ATPase-central復(fù)合體的Cryo-EM結(jié)構(gòu)顯示出旋轉(zhuǎn)的ATPase-like非對稱性》的文章中進(jìn)行EscN-EscO復(fù)合物的甘油梯度離心時,(1)使用BioComp梯度制備儀,,用EscNEscO-ADP-AlF3緩沖液,,制作10-25%的甘油梯度。(2)使用Biocomp分離儀將梯度分為14個餾分(3)用Biocomp紫外檢測器檢測分離的樣品并進(jìn)行電泳,。
2,、2019年1月《NATURE COMMUNICATIONS》雜志上發(fā)表《GAPDH的Malonylation是巨噬細(xì)胞的炎癥信號》的文章中進(jìn)行多核糖體分析時,(1)使用Biocomp儀器制備蔗糖梯度,。(2)使用Biocomp儀器檢測單個多核糖體組分,。
3、2019年2月《NATURE COMMUNICATIONS》雜志上發(fā)表《在哺乳動物細(xì)胞中基因表達(dá)水平的精確調(diào)節(jié)》的文章中進(jìn)行多核糖體分析時,,(1)使用Biocomp儀器制備10–50%(w/v)蔗糖梯度,。(2)使用Biocomp儀器從頂部分離梯度。
4,、2019年2月《Scientific Reports》雜志上發(fā)表《Ribosome profiling analysis of eEF3-depleted Saccharomyces cerevisiae》的文章中進(jìn)行多核糖體概要分析時,,(1)使用Biocomp梯度制成7–45%線性蔗糖梯度。(2)使用Biocomp檢測儀器測量260nm下的連續(xù)吸光度,,分析梯度成分,。
5.Biocomp設(shè)備工作的流程圖如下:
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