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一、公司簡介

Reichert總部位于美國布法羅市,，是一家極其卓絕并極具創(chuàng)新性的高科技企業(yè),。具有170余年研 發(fā)、設(shè)計及生產(chǎn)高級

光學儀器及分析儀器的歷史與經(jīng)驗,，并在過去20年里給全球生命科學和藥物 研發(fā)等領(lǐng)域用戶提供靈敏和穩(wěn)健的

表面等離子體（Surface Plasmon Resonance, SPR）儀 器,。僅在過去10年，采用Reichert公司SPR技術(shù)發(fā)表的高質(zhì)

量文獻多達數(shù)百篇,。Reichert生命科 學業(yè)務(wù)部將繼續(xù)研發(fā)并生產(chǎn)靈敏準確,、性價比高的SPR系統(tǒng)，使全球研究

者可以探索并超越 分子間相互作用非標記檢測的極限,。

Reichert總部位于美國紐約州布法羅市

獲取數(shù)據(jù)信息

• 濃度測定：可測定生物活性分子（蛋白,、抗體,、細胞因子,、生物標志物等）及（小分子化合物,、農(nóng)藥殘留、毒素等）準確濃度
• 是否結(jié)合（Yes/No）：可快速判斷分子間是否存在結(jié)合
• 親和力測定(KD)：可準確測定分子間從mM到pM范圍親和力
• 動力學測定(KD, Ka, Kd) ：通過實時動力學方式提供分子間結(jié)合快慢信息,，除了提供親和力信息外,，還可呈現(xiàn)結(jié)合常數(shù)和解離常數(shù)
• 熱動力學分析( △H，△S)：熱動力學分析可提供分子間結(jié)合深層次機理,，判斷焓驅(qū)動或熵驅(qū)動結(jié)合,，有助于藥物創(chuàng)新設(shè)計

應(yīng)用類型

• 蛋白-蛋白/核酸/糖/脂/小分子相互作用
• 完整細胞-分子相互作用
• 抗體-抗原相互作用
• 抗體篩選，表位篩選
• 疫苗、納米材料,、聚合物
• 脂質(zhì)體（Liposome）,、外泌體（exosomes）、病毒,、病毒樣顆粒（VLPs）
• 熱動力學分析 (△H & △S)
• 活性濃度分析

樣品類型

• 常規(guī)樣品：如蛋白,、核酸、小分子,、細胞上清、細胞裂解液上清等
• 完整細胞：可研究蛋白與完整原核及真核細胞,、以及膜性成分（包括細胞膜）之間相互作用
• 血液：直接檢測血液樣品,，減少處理步驟，排除純化過程對樣品的影響
• 細胞裂解液,、噬菌體,、膠體金顆粒、納米材料等

應(yīng)用案例

圖2. 大分子相互作用(HSA與anti-HSA相互                                           圖3. 小分子相互作用(CAII與95Da小分

作用)                                                                                            子Methanesulfonamide相互作用)

kon=1.77×10⁵M^-1s^-1,，koff=1.17×10^-3s^-1,，                                      kon = 3.92 ×10² M^-1s^-1，

KD=6.62nM                                                                                    koff = 2.56×10^-1 s^-1,，KD = 652 μM

圖4. SPR-熒光顯微鏡聯(lián)用(HEK細胞與纖維                                             圖5. DNA( T-bulge)與鋅指復(fù)合物相互作用

原蛋白相互作用)                                                                               kon=4.68×10³M^-1s^-1,，

kon1 = 2.4 ×10³ M^-1s^-1，koff1 = 8.5×10^-3 s^-1,，                                koff=1.7×10^-1s^-1,，

KD1 = 3.54 μM；kon2 = 9.7×103  M-1s-1,，                                        KD=36.4μM

koff2 = 2.5×10^-4 s^-1,，KD2 = 26.4 nM

圖6. 植物蛋白相互作用（植物蛋白TWD1                                      圖7. 酶抑制劑的熱動力學研究（4-CBS與

與生長素轉(zhuǎn)運抑制劑NPA相互作用）                                             CAII在20℃（藍線）及35℃（紅線）結(jié)合

KD=105μM                                                                                  的溫度依賴信號曲線，ΔH為-6.0kcal/mol ,。

圖8. 納米顆粒相互作用（納米金顆粒修                                           圖9. 納米顆粒相互作用（AP1修飾的

飾的多肽與其抗體相互作用）                                                        納米籠狀顆粒與IL-4的相互作用）

KD=0.30nM

圖10. SPR-電化學聯(lián)用（電壓對生物素標                                                    圖11. 化學溶液研究（CaCl2溶液對羧甲基

記的短肽與鏈霉親和素相互作用的影響）                                                    纖維素吸附的影響）

圖12A. 細菌相互作用（通過細菌特異                                                      圖12B. 細菌相互作用（分析菌落生長數(shù)）

直觀易用的軟件

• 數(shù)據(jù)分析處理：動力學分析曲線擬合至少5種模型可選：1:1model，1:2model,，2:1model, mass transport model,，2-state model等
• 數(shù)據(jù)分析可采用結(jié)合速率或結(jié)合信號，實驗數(shù)據(jù)也可直接導入其他專業(yè)數(shù)據(jù)分析軟件如Scrubber,，Clamp,，TraceDrawer等，分析結(jié)果支持多種輸出格式,，Excel,，JEPG等
• 數(shù)據(jù)采集和顯示：數(shù)據(jù)采集軟件可用于實驗方法創(chuàng)建、保存和運行，并能自動化控制檢測模塊,、進樣器,、注射泵等，可自行計算非常規(guī)溶劑或現(xiàn)行緩沖液的溫度系數(shù),，精確控制樣品倉溫度和樣品檢測溫度,，實現(xiàn)長時間無人值守自動化檢測，按照實驗要求完成熱動力學檢測等,，檢測過程中實時顯示所有步驟曲線
• 支持監(jiān)管法規(guī)環(huán)境,，符合GxP和21 CFR Part 11

種類豐富的各種芯片

• 傳感器芯片：≥12種，包括裸金芯片,、固定生物素化ligand芯片,、固定脂質(zhì)體的芯片、捕獲細胞的芯片,、特殊的捕獲芯片以及客戶自定義芯片
• 具有捕獲標記生物素的SA芯片和對應(yīng)試劑盒
• 捕獲帶His標簽蛋白的NTA芯片
• 具有捕獲細胞的芯片

靈敏度高,，數(shù)據(jù)可靠

ReichertSPR可為藥物研究、藥物發(fā)現(xiàn),、抗體篩選,、蛋白結(jié)構(gòu)/功能、基因調(diào)控及系統(tǒng)生物學研究等提供至關(guān)重要的定量信息,，可提供如下高質(zhì)量,、高可信度數(shù)據(jù):

• 嚴謹?shù)膭恿W分析，結(jié)合速率/解離速率-影響治療性候選分子適用性及劑量的生物學學位重要指標,。
• 親和力范圍從極弱到極強（1mM到1pM）,。使得研究細微和強效生物學通路以及更多療法選擇成為可能。
• 極低的噪音和基線漂移,，噪音水平0.05μRIU（RMS）,，基線漂移0.1μRIU/分鐘。

可選擇升級特殊流路,，拓展應(yīng)用

• 默認配置標準流路,，可滿足從小分子到細胞在內(nèi)的大多數(shù)應(yīng)用
• 采用Reichert SPR具有的特殊流路拓展應(yīng)用能力：電化學流路、石英窗流路（可引入第二光源）,，在檢測SPR數(shù)據(jù)的同時研究興趣分子光化學變化或熒光屬性（兼容光學顯微鏡）,、質(zhì)譜流路（用于鑒定結(jié)合到芯片表面的分子）。

獨特應(yīng)用

• 電化學流路：流路中興趣分子可引發(fā)芯片表面的電化學變化,，記錄SPR信號數(shù)據(jù)的同時進行SPR/電流分析,、SPR/脈沖伏安法、SPR/循環(huán)伏安法,，并可檢測聚合物的形成和其他新的應(yīng)用

• 光化學/熒光流路：引入第二光源,，在檢測SPR數(shù)據(jù)的同時研究興趣分子光化學變化或熒光屬性（兼容熒光顯微鏡）

• 質(zhì)譜流路（SPR-MS）：用于鑒定結(jié)合到芯片表面的興趣分子

利用Reichert發(fā)表的相關(guān)文章

Reichert SPR分子相互作用儀是利用經(jīng)典SPR原理獲得得到分子相互作用過程中量化數(shù)據(jù)的設(shè)備,。該設(shè)備可檢測的樣品既包括了經(jīng)典的抗體-抗原，也包括了核酸,、糖類和螯合物等分子類型,。近期有多篇利用Reichert SPR設(shè)備得到實驗結(jié)果的高質(zhì)量文獻發(fā)表。

1,、2018年,，Ekaterina V. Filippova等利用Reichert 4SPR在mBio上發(fā)表題為Structural Basis for DNA Recognition by the Two-Component Response Regulator RcsB的文章，文中結(jié)構(gòu)分析結(jié)果與體外結(jié)合分析的結(jié)果相結(jié)合,，為蛋白質(zhì)調(diào)控機制提供了有價值的見解,，證明了RcsB如何識別目標DNA序列，并揭示了一種獨特的寡聚狀態(tài),，使RcsB能夠形成同源和異源二聚體,。這些信息將幫助我們了解RcsB在細菌中轉(zhuǎn)錄調(diào)控的復(fù)雜機制。RcsB-DNA復(fù)雜結(jié)構(gòu)為RcsB的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機制的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)提供了深入的見解,，并為抗革蘭氏陰性病菌的新型抗菌化合物的設(shè)計提供了一個平臺。

2,、2018年,，Raluca ?tef?nescu等利用Reichert‐Ametek 2Ch‐7500（即現(xiàn)在的Reichert 2SPR）在Journal of Peptide Science上發(fā)表題為Molecular characterization of the β‐amyloid(4‐10) epitope of plaque specific Aβ antibodies by affinity‐mass spectrometry using alanine site mutation的文章，文中報道了為確定與抗體結(jié)合的氨基酸殘基的功能意義,，Aβ-表位序列中丙氨酸單堿基突變對抗原-抗體相互作用的產(chǎn)生影響,。這些結(jié)果在闡明結(jié)合機制和提高療效的Aβ-特異性抗體發(fā)展方面提供了有價值的信息。作者鑒定了單克隆抗體和多克隆抗體對β-淀粉質(zhì)斑塊特異性抗原表位的識別至關(guān)重要的氨基酸殘基,，這表明抗體在阿爾茨海默?。ˋD）治療方法發(fā)展中的特殊價值。

3,、2018年Samantha J. Katner等利用Reichert SR7500DC （即現(xiàn)在的Reichert 2SPR）在Inorganic Chemistry 上發(fā)表題為Comparison of Metal?Ammine Compounds Binding to DNA and Heparin. Glycans as Ligands in Bioinorganic Chemistry的文章,，文中結(jié)果擴展了我們對生理相關(guān)水合金屬陽離子與肝素配位化合物相互作用定義的理解。

4,、2018年,，Anna Kidakova等利用Reichert SR7500DC（即現(xiàn)在的Reichert 2SPR） 在Reactive and Functional Polymers上發(fā)表題為Preparation of a surface-grafted protein-selective polymer film by combined use of controlled/living radical photopolymerization and microcontact imprinting的文章，文中提出的簡單的合成策略為基于分子印跡的傳感系統(tǒng)的發(fā)展提供了一種前瞻性的解決方案,，可用于臨床檢測與多種疾病相關(guān)蛋白質(zhì),，如腎臟疾病、癌癥等,。